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D12492 是‌Research Diets 公司生产的 60% 高脂饲料‌（Research Diets D12492 60 kcal% Fat），是全球公认的诱导啮齿动物肥胖（DIO）模型的黄金标准饲料 。该饲料主要用于模拟人类高脂饮食环境，广泛应用于肥胖症、2 型糖尿病、代谢综合征及非酒精性脂肪肝等疾病的机制研究 。‌‌1我们的高脂肪饮食（HFD）含有60千卡%的脂肪，被称为D12492，是全球公认的诱发啮齿动物肥胖的黄金标准

ANO9在胃肠道癌中的作用仍不清楚。我们研究了ANO9在胃癌（GC）中的生物行为和临床预后值。使用ANO9 siRNA对人类GC细胞系进行了敲除实验。免疫组织化学（IHC）检查了晚期GC患者的84个原发性组织样本。ANO9的敲除减少了MKN7和MKN74细胞中癌细胞的进展。微阵列分析显示，ANO9通过干扰素（IFN）相关基因调节PD-L2。我们使用流式细胞仪证实，ANO9的消耗通过降低MKN7和MKN74细胞中PD-L2的表达来降低与PD-1的结合能力。IHC揭示了ANO9的表达和PD-L2之间的相关性，ANO9的强烈表达是晚期GC患者的一个独立不良预后因素。目前的结果表明，ANO9通过GC中的IFN相关基因调节PD-L2和与PD-1的结合能力。因此，ANO9有可能作为GC免疫检查点阻断（ICB）的生物标志物和靶点。

高果糖/苏作物饲料对啮齿动物血 浆脂肪水平和胰岛素抵抗的影响

蛋白质印迹的发明者是斯坦福大学 George Stark。Neal Burnette 于 1981 年所著的 Analytical Biochemistry 中首次被称为 Western Blot。最开始做印迹的是一个叫 Southern 的科学家，但印迹的对象是 DNA 链，他把这种技术称为 Southern blot，后来出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对 RNA，一个对蛋白质，人们分别把这两种技术的称为 Northern 和 Western。

Amicon® Ultra-0.5超滤离心管具有快速超滤功能，能够达到较高的浓缩倍数，轻松实现从稀释和复杂 的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本 处理，获得较高的样本回收率（通常>90%），并达到30倍的浓缩。根据标称分子量限值（NMWL） 的不同，典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也最大程度降低了溶质极化造成的滤膜结 垢；过滤管的死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后，浓缩样 本（截留部分）可通过一个简便的倒置（上下反转）离心步骤而实现高效回收。Amicon® Ultra-0.5超 滤管未经消毒，仅供一次使用。

近30年前，研究人员一直在寻找促进小鼠肉瘤细胞生长的方法。最终的解决方案就是：康宁Matrigel基质，其为分离自Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 小鼠肉瘤的可溶性基底膜提取物，该肿瘤富含ECM蛋白，如层粘连蛋白 (主要成分)、IV型胶原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖、巢蛋白和多种生长因子。

InvivoGen 的 MycoStrip 在为科学界开发支原体解决方案方面拥有 40 多年的经验，提供了一种检测细胞培养中支原体的新方法，使您能够对抗污染。

转染技术是指将外源分子如 DNA、RNA 等导入真核细胞的技术，它是研究基因表达调控，突变分析等的常规工具。随着功能研究的兴起，其应用越来越广泛。以下就向大家介绍一些转染的技术要点及市面上主要的转染试剂类型的选择。 常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染。前者外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒 DNA 转染效率较高，在转染后 24-96 小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β 半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染，外源 DNA 既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体（episome）存在。尽管线性 DNA 比超螺旋 DNA 转入量低但整合率高。外源 DNA 整合到染色体中概率很小，大约 1/104 转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（ APH；新霉素抗性基因），潮霉素 B 磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。 转染效率受多种因素影响，主要因素有下面几个： 1. 细胞培养物 健康的细胞培养物是成功转染的基础。不同细胞有不同的培养基，血清和添加物。低的细胞代数（<50）能确保基因型不变。高的转染效率需要一定的细胞密度，一般的转染试剂都会有专门的说明。推荐在转染前 24 小时分细胞，这将提供正常细胞代谢，增加对外源 DNA 摄入的可能。一定要避免细菌，支原体或真菌的污染。 2. 血清 大多数培养基在使用前需要加血清。胎牛血清（FCS）经常用到，便宜一点的有马或牛血清。通常的，血清是一种包含生长因子及其它辅助因子的不确切成分的添加物，对不同细胞的生长作用有很大的差别。血清质量的变化直接影响转染效率。因此在转染前建议先测(转右)试出对细胞生长良好的血清批号，转染时用同一批号的血清，并同时做负对照（不加转染试剂及外源 DNA）以测试细胞生长是否正常。有些转染技术如脂质体转染在有血清存在情况下效率很低，因此在转染前要除血清。但有些对此敏感的细胞如原代细胞会受到损伤，甚至死亡导致转染效率极低。 3. 载体构建 转染载体的构建（病毒载体，质粒 DNA，RNA，PCR 产物，寡核苷酸等）也影响转染结果。病毒载体对特定宿主细胞感染效率较高，但不同病毒载体有其特定的宿主，有的还要求特定的细胞周期，如逆转录病毒需侵染分裂期的宿主细胞，此外还需考虑一些安全问题（如基因污染）。除载体构建外，载体的形态及大小对转染效率也有不同的影响，如前面提到的超螺旋及线性 DNA 对瞬时和稳定转染的 影响。如果基因产物对细胞有毒性作用，转染也很难进行，因此选择组成或可调控，强度合适的启动子也很重要，同时做空载体及其它基因的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。 4. DNA 质量 DNA 质量对转染效率影响非常大。一般的转染技术（如脂质体等）基于电荷吸引原理，如果 DNA 不纯，如带少量的盐离子，蛋白，代谢物污染都会显著影响转染复合物的有效形成及转染的进行。核酸纯化世界品牌德国 QIAGEN 公司提供的超纯质粒抽提试剂盒，能达到两倍 2 x CsCl 梯度离心以上的纯度效果，使您不必为 DNA 质量操心。此外，对一些内毒素敏感的细胞（如原代细胞，悬浮细胞和造血细胞），QIAGEN 还提供可去除内毒素污染的质粒抽提试剂盒，在质粒抽提过程中有效去除脂多糖分子，保证理想的转染效果。 5.转染技术 转染技术的选择对转染结果影响也很大，许多转染方法需要优化 DNA 与转染试剂比例，细胞数量，培养及检测时间等。一些传统的转染技术，如 DEAE 右旋糖苷法，磷酸钙法，电穿孔法，脂质体法各有利弊，其主要原理及应用特点见下： 转染方法、原理及应用 DEAE- 右旋糖苷法带正电的 DEAE- 右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞瞬时性转染相对简便、结果可重复但对细胞有一定的毒副作用，转染时需除血清。 磷酸钙法 磷酸钙 DNA 复合物吸附细胞膜被细胞内吞稳定转染，瞬时性转染不适用于原代细胞，操作简便但重复性差，有些细胞不适用。 电穿孔法 高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA 通过膜上形成的小孔导入稳定转染，瞬时性转染，所有细胞适用性广但细胞致死率高，DNA 和细胞用量大，需根据不同细胞类型优化电穿孔实验条件。 阳离子性的脂质体法 带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞稳定转染。 瞬时性转染，所有细胞适用性广，转染效率高，重复性好但转染时需除血清。 转染效果随细胞类型变化大。 病毒介导法 逆转录病毒 通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中稳定转染，特定宿主细胞可用于难转染的细胞、原代细胞，体内细胞等，但携带基因不能太大。 细胞需处分裂期，需考虑安全因素 ，腺病毒瞬时转染，特定宿主细胞 可用于难转染的细胞，需考虑安全因素。 Biolistic 颗粒传递法 将 DNA 用显微重金属颗粒沉淀，再将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞，DNA 在胞内逐步释放，表达瞬时性转染 可用于：人的表皮细胞，纤维原细胞，淋巴细胞系以及原代细胞。 显微注射法 用显微操作将 DNA 直接注入靶细胞核稳定转染，瞬时性转染 转染细胞数有限，多用于工程改造或转基因动物的胚胎细胞。

如何才能更好地分离我的条带

凝集素是一类非免疫来源的carbohydrate结合蛋白，可以特异性识别carbohydrate部分并可逆地结合carbohydrate，具有凝集细胞或沉淀多糖和糖缀合物的能力。根据进化关系和分子结构，植物凝集素可分为7个不同的家族，即豆科植物凝集素、几丁质结合凝集素、II型核糖体失活蛋白和相关凝集素、GNA相关凝集素、Jacalin相关凝集素、Amarathin凝集素家族和葫芦科韧皮凝集素。

周细胞 周细胞是多能间质样细胞，在小血管壁中首次发现。周细胞对血管生成、微血管的结构完整性和血液流动调节都具有重要作用。然而，周细胞也可以发展成为被称为血管外皮细胞瘤的恶性肿瘤。 到目前为止，已经证明周细胞有能力分化为脂肪细胞、成骨细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞和吞噬细胞（巨噬细胞）。 The cells have been tested: CD146 / CD105 > 90 % positive, CD31 / CD34 > 95 % negative

PromoCell提供各种成年人干细胞，以及源于正常人类骨髓、脐带组织、脂肪组织、周围血和脐带血的已分化细胞。所有细胞均来自从相关医学中心获得批准的项目。同时，我们还可以模拟体外环境为这些细胞类型提供高质量的培养基以及优化的细胞分化培养系统。

间充质干细胞（MSC），也被称为间充质基质细胞，是可以分化为一系列不同细胞类型的一种多能细胞，同时有自我更新的能力。研究表明，MSC可以在体外或体内环境下分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、肌细胞，神经细胞、肝脏细胞和胰岛细胞。可以提供优化的PromoCell培养基，用于支持MSC的生长及其向各种不同细胞系的分化。最近的实验表明，不同来源的MSC之间向多种细胞类型的分化能力也存在差异。

链霉亲和素是通过特定的亲和系统，从Streptomyces avidinii菌分离得到的均质产品，超纯的链霉亲和素具有良好的特异性结合能力，是检测或纯化生物素化蛋白质、核酸及其他大分子物质的有力工具，可应用于免疫组化（IHC）/免疫细胞化学（ICC），免疫荧光（IF），酶联免疫吸附法（ELISA）等。

Jackson ImmunoResearch 是美国杰出的二抗生产厂商，其在免疫球蛋白的生产和纯化方面拥有35年的经验。作为世界上最值得信赖的供应商之一，Jackson公司的二抗以种类丰富（物种齐全，标记多样，应用广泛），性价比高，深受科研学者和工业客户的青睐。除了多种标记的二抗，还可提供对照蛋白和链霉亲和素结合物。

Cayman以帮助全球从事人类健康以及动物健康研究事业的科学家提供研究工具为使命，承诺为广大科研人员提供优质的产品和实惠的价格政策。其拥有众多从事化学化成、纯化、生化分子的鉴定等领域的科学家。同时，在免疫检测、抗体生产、蛋白表达、蛋白结晶和测定等方面也具有丰富的研发和生产经验。在过去的30多年里，Cayman积淀了深厚的脂质化学知识，这些知识使得Cayman能够生产出品质卓越的试剂，用于癌症、氧化损伤、表观遗传学、神经科学、炎症、代谢等领域的研究。目前，Cayman可提供生化试剂，抗体，EIA检测试剂盒，蛋白等多种产品。

产品主要应用：点击化学(Click Chemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2D DIGE)和实时荧光定量PCR(Realtime PCR)。 产品包括：N-羟基琥珀酰亚胺酯类活性染料；羰基活性荧光染料；氨基类染料 ；巯基反应性染料；羧酸类染料。 2. Lumiprobe重点产品 N-羟基琥珀酰亚胺酯类活性染料；羰基活性荧光染料；氨基类染料 ；巯基反应性染料；羧酸类染料。

Flow-er们大概都有自己的一套配色原则，但配色好后，要找到对应的流式抗体又是一个烦恼，最怕的是没有找到合适的流式抗体，只能回到前面的步骤重新调整配色方案。Invitrogen免费线上配色工具可以省去寻找抗体货号的困扰，5步就可以简单完成配色。

康宁新推出-Corning MSC Xeno-Free SFM（Corning Cat. No 88-600-CV）,成分明确，无异源动物成分，无需包被，可直接用于培养支持多种来源间充质干细胞体外长期生长的培养基，如骨髓，脂肪组织和脐带，同时还能保持自我更新及多向分化潜能.是体外扩增间充质干细胞的理想选择。